Thursday 5 September 2013

Nguyên lý đo quang trong xét nghiệm hóa sinh



1, NGUYÊN LÝ TÍNH TOÁN NỒNG ĐỘ

K=
     C mẫu chuẩn
--------------------------
MĐQ mẫu chuẩn


C mẫu thử =
MĐQ mẫu thử
x C mẫu chuẩn
------------------------
MĐQ mẫu chuẩn


Trong đó C là ký hiệu nồng độ (concentration), MĐQ là mật độ quang
C mẫu thử = MĐQ mẫu thử x K ( hệ số factor )

2, CÁC PHÉP ĐO QUANG:

2.1 phép đo điểm cuối ( End point )

- Định nghĩa: phép đo điểm cuối là một phép đo phức hợp màu tốc độ phản ứng tuyến tính với thời gian, phản ứng kết thúc hoàn toàn sau một thời gian nhất định.

- Đặc điểm:
+ đo phức hợp màu.
+ tốc độ phản ứng tuyến tính với thời gian
+ phức hợp màu ổn định
C mẫu thử =
MĐQ mẫu thử
x C mẫu chuẩn
= MĐQ mẫu thử x K
------------------------
MĐQ mẫu chuẩn

- Các xét nghiệm hóa sinh: định lượng Glucose, protein, Albumin, Cholesterol, Triglycerid, HDL_c, LDL_c, Ure ( so màu ), Bilirubin

- chú ý:

+ Ủ đủ thời gian
+ Không được để lâu quá ( 20 - 30 ' )
Chú ý đến màu sắc bệnh phẩm ( đối với bilirubin làm thêm ống trắng bệnh phẩm để trừ đi mật độ quang )

2.2 phép đo 2 điểm ( two point, Fixtime )

- Định nghĩa: phép đo 2 điểm là phép đo phức hợp màu tốc độ phản ứng không tuyến tính với thời gian, không xác định được thời điểm kết thúc của phản ứng
t1: 30s
t2: 90s

- Đặc điểm:

+ là phép đo 2 điểm, đo phức hợp màu

+ tốc độ phản ứng không tuyến tính với thời gian

∆A = A2 - A1 trong đó ∆A là hiệu số mật độ quang

C thử =
MĐQ thử
x C chuẩn = ∆A thử x K
------------------
MĐQ chuẩn

Chú ý lắc đều đo ngay.

- Các xét nghiệm hóa sinh:  Creatinine, Urea UV

2.3, phép đo động học enzym ( kinetic )

- Định nghĩa: là phép đo nhiều điểm, tốc độ phản ứng tuyến tính với thời gian có tác dụng đo một độ quang của sản phẩm tạo thành ( vd: đo enzym Amylase ) hoặc đo sự giảm dần của nồng độ cơ chất ( vd: GOT, GPT ) thông thường đo ở 5 thời điểm t1 = 30s, t2 = 45s, t3 = 60s, t4 = 75s, t5 = 90s

lấy hiệu số mật độ quang giữa hai thời điểm

∆A1 = A2 - A1
∆A2 = A3 - A2
∆A3 = A4 - A3
∆A4 = A5 - A4

tính trung bình mật độ quang giữa các thời điểm
∆Ā =
∆A1 + ∆A2 + ∆A3 + ∆A4
----------------------------------
4

C thử = ∆A x K ( k là hệ số factor do hãng sản xuất hoá chất xét nghiệm cung cấp )

Chú ý lắc đều, đo ngay
- Các xét nghiệm: GOT, GPT, Amylase, Ck, CkMb.